Бактериологический посев на уреаплазму представляет собой специальное исследование в микробиологической лаборатории на выявление в, полученном от пациента, биоматериале уреаплазмы (u.urealyticum) и определении чувствительности этого микроорганизма к антибиотикам.
Способы забора биоматериала для посева на уреаплазму у женщин:
• Мазок из уретры берется специальным стерильным тампоном, по истечении минимум 1 часа от последнего мочеиспускания.
• Отделяемое с поверхности заднего свода влагалища берут стерильным тампоном и помещают его в транспортную среду.
• Из цервикального канала соскоб берется специальной цитологической щеткой.
Особенности забора биоматериала для посева на уреаплазму у мужчин:
• Из уретры материал получают специальным ватным тампоном или ложкой Фолькмана, не ранее, чем через 1 час после мочеиспускания.
• Исследование биоматериала из отделяемого простаты производят из первой порции мочи после проведения массажа простаты. Порцию мочи цинтрифугируют и на исследование направляют центрифугат.
• При наличии любых других воспалений мочеполовой системы берут соскобы с поверхности воспалительного очага или его отделяемого.
Уреаплазма относится к чувствительным микроорганизмам, поэтому для достоверности результата соблюдают определенные правила:
• Биоматериал берут до начала проведения антибиотикотерапии
• Забор производят строго в асептических условиях, соблюдая технику безопасности;
• Срок доставки биоматериала в лабораторию не должен превышать 2 часов. Превышение данного промежутка времени приведет к гибели большинства уреаплазм, так как данный микроорганизм очень чувствителен к окружающей среде. По истечении 2 часов будет наблюдаться рост в биоматериале других микроорганизмов, менее требовательных к условиям окружающей среды.
• При транспортировке используют специальные контейнеры, защищающие биоматериал от света, тепла или холода, механических повреждений.
Особенности культуральных свойств уреаплазмы
Культивируют Ureaplasma urealyticum на твердых и жидких питательных средах. Но на жидких средах микроорганизм культивируется хуже. Жидкая среда готовится путем смешивания лиофилизированного питательного раствора с дистиллированной водой. Готовый раствор имеет желтую окраску. Одна из особенностей U.urealyticum состоит в ее способности к гидролизу мочевины, так как это единственный вид микроорганизмов, который продуцирует фермент – уреазу.
При росте в жидкой среде уреаплазмы изменяют ее цвет с желтого на розовый или малиновый. Достоверным считается результат при отсутствии в среде мути. Помутнение среды при любом методе исследования говорит о росте посторонних микроорганизмов. Полученные результаты сравнивают с контрольной, не засеянной биоматериалом, средой желтого цвета. Отрицательным считается результат, когда цвет среды в исследуемых пробирках не изменяется. Это качественный анализ.
В микробиологической лаборатории для подтверждения результатов используют и полуколичественный анализ. Для этого проводят последовательные разведения исходной пробы с определенным шагом, обычно 10. По изменению цвета среды в последующих пробирках, по сравнению с исходной и контрольной, судят о количестве колоний-образующих единиц в 1 мл раствора. Обнаружение уреаплазм в количестве более 104КОЕ/мл в сочетании с выраженной клинической картиной подтверждает диагноз уреаплазменной инфекции. Количество уреаплазм – менее104КОЕ/мл, без клинических признаков, расценивается как скрытое носительство инфекции.
Для роста уреаплазмы на плотной питательной среде необходимо соблюдать определенные показатели газового состава воздуха: содержание углекислоты и азота должно соответствовать процентному соотношению 5:95. Либо, создавая кислородную среду, нужно выдерживать соотношение кислород: углекислота: азот, равное 5: 10: 85. В первый день посева на уреаплазму тампон с биоматериалом вносят на лабораторную чашку с питательной средой и круговыми движениями размазывают по поверхности. Можно использовать способ посева по секторам. То есть, движения производить от периферии к центру, визуально разделяя чашку Петри на секторы.
Учет роста производят через 1-2 суток при выдерживании сред в термостате при температуре 37°С. На плотных средах уреаплазма образует мелкие колонии морщинистой структуры, с зубчатым краем, форма которых округлая. Эти колонии подвергают микроскопическому исследованию для установлении морфологии.
Для определения антибиотикочувствительности микроорганизма используют специальную тест-систему. Она представляет собой среду, с 8 нанесенными антибиотиками. По отсутствии роста бактерии вокруг определенных секторов антибиотиков выявляют эффективные и чувствительные для нее препараты.
